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末端脫氧核苷酸轉移酶

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末端脫氧核苷酸轉移酶Terminal deoxynucleotidyl transferaseTdT、末端轉移酶),是一種特殊的DNA聚合酶,顯示出未成熟的、"前B","前T淋巴細胞"和"急性淋巴性白血病/淋巴瘤細胞"。"末端轉移酶"於"抗體基因重組時"加上N核苷酸(N-nucleotide)至V(D)J外显子上,能夠形成連接多樣性(Junctional diversity)的現象。在人類中,末端轉移酶是由DNTT基因來編碼。 [1][2]

TdT不存在於"胎肝造血干细胞"上,而在胎兒期明顯的損害B細胞之連接多樣性[3]

功能

"末端轉移酶"催化添加核苷酸至DNA分子的3'末端的反应。不像大多數的DNA聚合酶,它不需要一個模板。這種酶的優選底物是3'突出端,但它也可以添加"核苷酸"(nucleotides)至"鈍末端"(blunt end)或"凹陷的3'末端"(recessed 3' end)。是一種必要的辅因子,但是在"體外"反应条件下(in vitro)鎂(Mg)及錳(Mn)也可以起相同的作用。

使用

末端轉移酶在分子生物學中的應用。它可以被用來在快速擴增cDNA末端(RACE)中來添加"核苷酸"(nucleotide),然後可以用來作為在後續PCR的"引物"(primer)的模板。它也可以用於添加標記放射性同位素的核苷酸,例如在TUNEL检测(末端脫氧核苷酸轉移酶"dUTP缺口末端標記"(dUTP Nick End Labeling)),用於细胞凋亡的示範(其中的標記,在某種程度上,通過片段化DNA來進行)。也可用於治療"急性淋巴性白血病"診斷之"免疫熒光測定"(immuno-fluorescence)。[4]

免疫組織化學中,抗體TdT酶可用於顯示未成熟的T細胞和B細胞以及多能的"造血(Haematopoiesis)幹細胞"的存在,其具有抗原,而成熟的淋巴樣細胞總是呈"TdT陰性"。而末端轉移酶陽性的細胞中發現少量的健康淋巴結扁桃體,急性淋巴細胞白血病的惡性細胞也呈"TdT陽性",而抗體,因此可以被用來作為面板診斷及區別這種疾病的一部分,比如,"初發期的小細胞腫瘤"(small cell tumours of childhood)。[5]

參見

註釋

  1. ^ Isobe M, Huebner K, Erikson J, Peterson RC, Bollum FJ, Chang LM, Croce CM. Chromosome localization of the gene for human terminal deoxynucleotidyltransferase to region 10q23-q25. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. September 1985, 82 (17): 5836–40. PMC 390648可免费查阅. PMID 3862101. doi:10.1073/pnas.82.17.5836. 
  2. ^ Yang-Feng TL, Landau NR, Baltimore D, Francke U. The terminal deoxynucleotidyltransferase gene is located on human chromosome 10 (10q23-q24) and on mouse chromosome 19. Cytogenet. Cell Genet. 1986, 43 (3-4): 121–6. PMID 3467897. doi:10.1159/000132309. 
  3. ^ Hardy, Richard. Chapter 7: B Lymphocyte Development and Biology. Paul, William (编). Fundamental Immunology (Book) 6th. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins. 2008: 237–269. ISBN 0-7817-6519-6. 
  4. ^ Faber J, Kantarjian H, Roberts MW, Keating M, Freireich E, Albitar M. Terminal deoxynucleotidyl transferase-negative acute lymphoblastic leukemia. Arch. Pathol. Lab. Med. January 2000, 124 (1): 92–7. PMID 10629138. 
  5. ^ Leong, Anthony S-Y; Cooper, Kumarason; Leong, F Joel W-M. Manual of Diagnostic Cytology 2. Greenwich Medical Media, Ltd. 2003: 413–414. ISBN 1-84110-100-1. 

延伸阅读

外部連結