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共軛焦顯微鏡

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Confocal Microscopy
MeSHD018613
OPS-301 code3-301
熒光和共軛焦顯微鏡的工作原理

共軛焦顯微成像技術(英語:Confocal microscopy)是一種利用逐點照明和空間針孔調製來去除樣品非焦點平面的散射光的光學成像手段,相比於傳統成像方法可以提高光學解析度和視覺對比度。

商業化的共軛焦顯微鏡(Confocal microscope)分三類:

  • 共軛焦雷射掃描顯微鏡Confocal Laser Scanning Microscope,CLSM,LSCM
  • 轉盤共軛焦顯微鏡(Spinning-disk (Nipkow disk) confocal microscopes
  • 可程式序陣列顯微鏡(Programmable Array Microscopes (PAM)

基本原理

從一個點光源發射的探測光通過透鏡聚焦到被觀測物體上,如果物體恰在焦點上,那麼反射光通過原透鏡應當匯聚回到光源,這就是所謂的共軛焦,簡稱共焦。共焦顯微鏡在反射光的光路上加上了一塊二向色鏡(dichroic mirror),將已經通過透鏡的反射光折向其它方向,在其焦點上有一個帶有「針孔」(Pinhole),小孔就位於焦點處,擋板後面是一個光電倍增管(photomultiplier tube,PMT)。可以想像,探測光焦點前後的反射光通過這一套共焦系統,必不能聚焦到小孔上,會被擋板擋住。於是光度計測量的就是焦點處的反射光強度。其意義是:通過移動透鏡系統可以對一個半透明的物體進行三維掃描。這樣的構想,是在1953年, 美國學者馬文·明斯基提出,經過了30年的發展,才利用雷射為光源,發展出符合馬文·明斯基理想的共軛焦顯微鏡。

相關應用

  1. ^ Thomson, Steve. Retinal Topography with the Heidelberg Retina Tomograph. Journal of Audiovisual Media in Medicine. 1994-01-01, 17 (4). ISSN 0140-511X. doi:10.3109/17453059409087701. 
  2. ^ Heidelberg Retinal Tomography | Department of Ophthalmology. ophthalmology.med.ubc.ca. [2023-04-21]. (原始內容存檔於2023-02-02).