RIPA裂解液

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RIPA裂解液(英語:Radioimmunoprecipitation assay buffer,全稱放射免疫沉澱法緩衝液)是一種用於裂解細胞或組織的裂解緩衝液英語Lysis_buffer,常用於放射性免疫沉澱分析(RIPA)[1][2]。此緩衝液的變性性能比NP-40裂解液英語Nonidet P-40曲拉通X-100裂解緩衝液更強,因為它包含離子型去垢劑SDS脫氧膽酸鈉作為破壞核膜,提取核內物質的活性成分。RIPA緩衝液在實驗時能提供低的背景,但也會使激酶變性。

配方

用於提取總蛋白質的RIPA緩衝液配方如下:

  • 25mM Tris (也可以用10mM 磷酸緩衝液來代替)pH值為7-8
  • 150mM 氯化鈉
  • 0.1% SDS(可選)
  • 0.5%的 脫氧膽酸鈉
  • 1%的Triton X-100或 NP-40
  • 蛋白酶抑制劑,例如苯甲基磺醯氟(PMSF)或其它蛋白酶抑制劑(根據試劑商提供的說明使用)。

參考文獻