磷酸鹽緩衝生理鹽水
磷酸鹽緩衝生理鹽水(英語:Phosphate buffered saline,簡稱為PBS)是生物學研究中常用的緩衝液。這是一種以水為溶劑的含磷酸鈉的鹽溶液,在某些配方中還加入了氯化鉀及磷酸鉀。該溶液的滲量與離子濃度與人體中的是相符的。
應用
因其等張且對細胞無毒性,PBS非常常用。用法包括:稀釋物質及清洗細胞容器。含EDTA的PBS亦常用於解開貼壁及成團的細胞,而不能加入如鋅等的二價金屬,因為這樣會導致沉澱。針對不同的應用,常使用古德氏緩衝液。
配製
配製PBS的方法有多種。一些配方不含鉀離子,而另一些配方含鈣或鎂[1]。通常PBS含下列組分:
鹽 | 濃度 | 濃度 |
---|---|---|
(mmol/L) | (g/L) | |
NaCl | 137 | 8.01 |
KCl | 2.7 | 0.20 |
Na2HPO4·2H2O | 10 | 1.78 |
KH2PO4 | 2.0 | 0.27 |
pH 7.4 |
配製PBS溶液的最簡單方法是使用PBS片,後者是已制好的配方片劑,當需要使用PBS時只需將其溶解於一定量的蒸餾水裏即可,標準容積有:100、200、500和1000 mL[2]。
配好的PBS溶液經分裝並高壓滅菌(20分鐘,121℃)後即可用於細胞培養。PBS可儲存於室溫,但如果溶液未經滅菌而希望保存時間長些,則需要將其冷藏於冰箱中,這樣會抑制細菌生長。然而濃縮儲存液在冷藏時會產生沉澱,在使用之前需要置於室溫使沉澱完全溶解。
另見
參考文獻
- ^ Dulbecco, R. et al. (1954): Plaque formation and isolation of pure lines with poliomyelitis viruses. In: J. Exp. Med. vol. 99 (2), pp. 167-182. doi:10.1084/jem.99.2.167 PMID 13130792
- ^ Medicago AB, (2010) Phosphate buffered saline specification sheet (PDF). [2013-11-03]. (原始內容存檔 (PDF)於2013-11-04).